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C株猪瘟病毒NS3蛋白抗原表位分析及分段表达活性检测

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以经典毒株C株的基因组为模板,测序后对NS3蛋白的二级结构进行分析,并对抗原表位进行预测,结果表明NS3的二级结构非常丰富并且存在丰富的B细胞抗原表位和T细胞抗原表位.截获3个不同的基因区域a、b和c,并设计相应的引物,分别扩增出约645、609和615 bp的靶基因,分别用pET-28a表达载体进行重组后,获得pET-28a-NS3a、pET-28a-NS3b与pET-28a-NS3c,用表达菌株BL21(DE3)进行表达,b段表达较高,可溶性表达较好,纯化后,可获得重组蛋白CSFV-His-NS3b,SDS-PAGE验证表达的重组蛋白大小约为27 kD,Western-Blot证实其具有良好的免疫原性,并且通过ELISA测得蛋白浓度约5 mg/mL,表明该蛋白特异性很强,可用于猪瘟诊断试剂盒的开发应用.
Analysis of Epitope of NS3 Protein of Classical Swine Fever Virus Strain C and Detection of Its Segmented Expression Activity

NS3 proteinExpressionDiagnosis

丁国伟、李甜甜、徐萍、魏荣荣、李琛、王设市、潘晨、范娟

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扬州市扬州优邦生物药品有限公司,江苏扬州225008

NS3蛋白 表达 诊断

扬州市科技计划项目

YZ2021098

2023

10.3969/j.issn.0517-6611.2023.18.025

安徽农业科学
安徽省农业科学院

安徽农业科学

影响因子：0.413
ISSN：0517-6611
年,卷(期)：2023.51(18)
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