摘要
试验以云南三台核桃幼叶为试材提取基因组DNA,并用正交设计方法,比较了Taq酶、Mg2+、引物、dNTPs和DNA模板等5因素5水平共25个反应体系的ISSR-PCR扩增结果.确定三台核桃ISSR-PCR的反应体系为:20 μL反应体系中Taq酶0.25 U、Mg2+为2.0 mM/L、引物0.8 μM/L、dNTPs 0.4 mM/L、10×PCR Buffer 2 μL和10 ng模板DNA.该体系的建立为今后利用ISSR技术进行三台核桃遗传图谱的构建、基因定位、种质资源鉴定与分类和遗传多样性分析奠定了技术基础.
基金项目
国家栽培攻关资助项目(2006BAD18B0203-20)