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金线莲ArLBD1基因克隆、亚细胞定位及表达分析

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以金线莲(Anoectochilus roxburghii)叶片的转录组数据为基础,采用RT-PCR技术克隆到了金线莲ArLBD1转录因子基因,采用生物信息学、原核表达、Western blot、亚细胞定位及qPCR等方法对该基因功能进行初步分析,以期为进一步研究其功能提供参考依据.结果表明:ArLBD1基因CDS长度864 bp,编码287个氨基酸.ArLBD1蛋白分子量为30.62 kD,理论等电点为6.25,不稳定系数55.55,属于不稳定蛋白.ArLBD1蛋白含有LOB superfamily保守结构域,第7～28氨基酸为C基序,第36～84氨基酸为GAS基序,第89～107氨基酸为类亮氨酸拉链基序,具有完整的类亮氨酸拉链基序,属于Class Ⅰ.系统进化分析表明ArLBD1与拟南芥AtLBD36的亲缘关系最近,其次是AtLBD6.SDS-PAGE电泳及Western blot结果显示,ArLBD1基因在大肠杆菌中成功诱导表达.亚细胞定位分析发现ArLBD1蛋白定位在细胞核.qPCR分析结果表明,ArLBD1基因在金线莲叶、茎和根中都能检测到表达,在叶片表达量最高,其次是根,茎的表达量最低,推测Ar-LBD1基因主要在金线莲叶片发育中发挥功能.
Gene Cloning,Subcellular Localization and Expression Analyses of ArLBD1 Gene in Anoectochilus roxburghii

Anoectochilus roxburghiiArLBD1subcellular localizationgene cloningprokaryotic expression

林江波、黄惠明、邹晖、李和平、戴艺民

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福建省农业科学院 亚热带农业研究所,福建 漳州 363005

金线莲 ArLBD1 亚细胞定位 基因克隆 原核表达

福建省省属公益类科研院所基本科研业务费专项福建省农科院科技创新团队项目

2021R1030001CXTD2021001-2

2024

10.11937/bfyy.20232489

北方园艺
黑龙江省农业科学院 黑龙江省园艺学会 黑龙江省农业科学院编辑出版中心

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CSTPCD北大核心
影响因子：0.506
ISSN：1001-0009
年,卷(期)：2024.(1)
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