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华北落叶松胚性组织超低温保存技术研究

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[目的]超低温保存是植物优良种质长期保存的重要方法.本文为探究梯度预处理对超低温保存存活率的影响,以期有效保存华北落叶松胚性组织的发育潜能.[方法]本研究以华北落叶松胚性组织为材料,对超低温冷冻保存程序中预培养、冷冻处理方式、解冻方式和恢复培养等关键环节开展研究.预培养和冷冻保护共设计成4种处理,以不经过预培养和冷冻保护直接冷冻保存为对照,每个处理重复3次.[结果]结果表明:处理组合1、2、3之间虽无显著差异,但结合冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)对细胞具有一定毒害作用,高浓度的DMSO会影响后续胚性组织的恢复甚至造成细胞死亡,因此选出效果较好的超低温保存方法为:0.2、0.4 mol/L山梨醇液体梯度预处理与0.4 mol/L山梨醇+5％DMSO为冷冻保护剂进行冷冻保护,最佳解冻方式为37℃水浴,解冻后的胚性愈伤组织细胞活性最高达78％;超低温保存后的胚性组织与正常增殖的胚性组织在外观及显微结构上无明显差异,且低温保存后的愈伤组织仍保持分化形成体细胞胚的能力.[结论]研究结果为华北落叶松乃至其他针叶树胚性组织的超低温保存提供了参考.
Cryopreservation of embryogenic callus for Larix gmelinii var. principis-rupprechtii

陈晓艺、江帅菲、代剑峰、袁德水、Lisheng Kong、张金凤、赵健

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北京林业大学生物科学与技术学院,林木育种国家重点工程实验室,北京 100083

林木分子设计育种高精尖创新中心,北京 100083

河北省林业科学研究院,河北 石家庄 050061

河北省木兰围场国有林场管理局,河北 承德 068450

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华北落叶松 超低温保存 胚性愈伤组织 梯度预处理

国家重点研发计划现代种业科技专项国家自然科学基金青年科学基金中央高校基本科研业务费专项

2017YFD0600404-120326333D31901289BLX2015-14

2021

10.12171/j.1000?1522.20200251

北京林业大学学报
北京林业大学

北京林业大学学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.237
ISSN：1000-1522
年,卷(期)：2021.43(10)
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