[目的]探讨构建微核心种质的方法,旨在为精准选择毛白杨杂交亲本或研究材料提供科学依据,为其他物种构建微核心种质提供参考.[方法]本研究利用荧光SSR分子标记对272份毛白杨样本进行分子基因型检测,计算每个样本对总体遗传多样性的贡献值,从大到小全部排序,计算新排序的前25％、20％、15％、10％、5％、2.5％、2％和1.5％共8个取样比例的平均有效等位基因数(Ne)、平均Shannon信息指数(I),平均期望杂合度(He)和平均多态信息指数(PIC)值等,分析微核心种质的代表性,通过与前面的取样比例以及原始种质的相应参数进行比较,确定合适的微核心种质取样比例.利用t检验进行统计学验证.根据所有引物的峰值,构建每份微核心种质的指纹图谱.基于指纹图谱的差异,分析挖掘特异等位基因.[结果](1)当取样比例由25％逐渐降为2％时,Ne、He和PIC这3个重要的遗传多样性参数分别逐渐达到最大值,而I在取样比例为10％时达到最大值.(2)当取样比例为2％时,Ne、I、He和PIC值分别是3.513、1.254、0.643和0.597,均大于272份原始种质的相应值2.075、0.825、0.432和0.364,表明构建的微核心种质有效去除了遗传冗余,具有丰富的遗传多样性.(3)t检验结果表明:所构建的微核心种质与原始种质的遗传多样性无显著差异,具有可靠的代表性,可以作为微核心种质.(4)不论10％、5％还是2％取样比例,杂交种质所占比例均大于50％.(5)218号样品在11号位点拥有特异等位基因,261号样品在16号位点拥有特异等位基因,263号样品在7号位点拥有特异等位基因.[结论]毛白杨微核心种质最为科学、可信、简约和高效的取样比例为2％ ～10％,其中最精准的取样比例为2％.如果种质资源数目较大,可以根据遗传多样性适当降低取样比例;如果基数较小,可以适当升高.建议以后构建核心种质或者微核心种质时,不要先人为进行分组,而是先根据每个样品对总体遗传多样性的贡献从大到小排序.本研究从分子水平证明杂交种质在种质资源保存和林木遗传育种中占有重要地位,将为其他物种微核心种质构建提供参考.
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