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榛子全基因组ChSEP基因鉴定、多克隆抗体制备及其在胚珠中的表达研究

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[目的]正常的胚珠充实是榛子种仁形成的前提与基础,胚珠充实不足可频繁导致瘪仁、空壳果实的形成,SEP基因被认为是可以影响胚珠发育的E类MADS-box基因.为研究SEP在榛子种仁充实过程中的重要调节作用,拟鉴定参与榛子胚珠发育的重要作用基因ChSEP,并制备ChSEP的多克隆抗体,开展正常发育与败育胚珠中ChSEP的免疫组织化学分析,以期为深入解析SEP基因调控榛子胚珠发育机制提供科学依据.[方法]用榛子基因组与转录组数据鉴定基因组中所有的SEP基因家族成员,并进行重要SEP基因的原核表达载体构建、基因表达及多克隆抗体制备,最后对参与胚珠发育调控的重要 SEP蛋白进行免疫组织化学检测.[结果](1)榛子基因组中鉴定到 3 条 ChSEP蛋白序列(Cor0054610.1、Cor0008190.1、Cor0119400.1),所有ChSEP蛋白均包含SRF-TF与K-box结构域.制备了Cor0054610.1的多克隆抗血清E18305和E18306,它们的抗体抗原条带分子量在 45 kDa左右,1∶1 000 稀释后可检测到 1~2 ng抗原.(2)免疫组织化学分析结果表明:ChSEP在发育胚珠与败育胚珠的珠被中均有表达,珠被中的ChSEP表达量高于子叶,正常发育胚珠与败育胚珠 ChSEP分布特征差异不明显.[结论]本研究在转录与蛋白水平上提供了 ChSEP(Cor0054610.1)参与榛子胚珠发育调控的证据,为深入解析榛子胚珠发育机理提供了科学依据.
Identification of ChSEP genes in the whole genome of hazelnut,preparation of polyclonal antibody and expression in ovules

hazelnutSEPprocaryotic expressionpolyclonal antibodyimmunohistochemistry

赵棣、胡献文、魏珩、程云清、刘剑锋

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吉林师范大学吉林省植物资源科学与绿色生产重点实验室,吉林四平136000

榛子 SEP 原核表达 多克隆抗体 免疫组织化学

国家自然科学基金吉林省科技厅中青年科技创新创业卓越人才(团队)项目

3217184020210509033RQ

2023

北京林业大学学报
北京林业大学

北京林业大学学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:1.237
ISSN:1000-1522
年,卷(期):2023.45(8)
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