螨ace/S154G突变型原核表达载体的构建及其蛋白纯化

Constructing prokaryotic expression vector of acetylcholinesterase mutant ace/S154G from Tetranychus cinnabarinus and its protein purification

杨金 ¹李超 ¹李博 ¹卜春亚¹

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作者信息

1. 农业农村部华北都市农业重点实验室/北京农学院生物与资源环境学院,北京102206
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摘要

[目的]体外表达朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶突变型ace/S154G来探究世界性害螨AChE S154位点的功能.[方法]构建pET-30a/ace /S154G重组表达载体,诱导表达后纯化目的蛋白,并进行Western Blot检测.[结果]ace/S154G在pET-30a载体上成功高水平表达,对AChE/S154G进行大量表达和纯化,经Western Blot验证,获得纯度较高的目的蛋白.[结论]实现ace/S154G体外高效原核表达,获得AChE/S154G突变体重组蛋白,为探明朱砂叶螨AChE的S154位点的功能,研发新型选择性杀螨剂奠定基础.

关键词

朱砂叶螨/乙酰胆碱酯酶/pET-30a/原核表达/纯化

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基金项目

国家自然科学基金(31670648)

北京市自然科学基金(6162004)

出版年

2020

北京农学院学报

北京农学院

北京农学院学报

影响因子：0.539

ISSN：1002-3186

参考文献量11

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