北京农学院学报2020，Vol.35Issue(4) ：77-81.DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2020.0416

猪细小病毒7型cap蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

Prokaryoticexpression and polyclonal antibody preparation of cap protein of porcine parvovirus Type 7

吕莫然 袁枫 李子璇 全荣 朱珊珊 刘爵
北京农学院学报2020，Vol.35Issue(4) ：77-81.DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2020.0416
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猪细小病毒7型cap蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

Prokaryoticexpression and polyclonal antibody preparation of cap protein of porcine parvovirus Type 7

吕莫然 1袁枫 2李子璇 2全荣 2朱珊珊 2刘爵2
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作者信息

  • 1. 北京农学院动物科学技术学院,北京102206
  • 2. 北京农林科学院,北京100097
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摘要

[目的]为后续研发最新型PPV疫苗,控制猪细小病毒传染性,以及建立ELISA检测方法鉴定基础.[结果]对已发表的37株完整猪细小病毒7型cap蛋白的核苷酸序列进行比对,将得到的保守序列根据大肠杆菌的偏好进行密码子优化后合成基因,得到全长为1 422 bp的基因,并与原核表达载体pET-32a(+)连接,获得重组质粒pET-32a-cap,经PCR扩增测序鉴定后,将其转化到大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞中,进行IPTG诱导表达及Western blotting鉴定.对获得的重组融合蛋白进行可溶性分析、纯化,免疫BALB/c小鼠和豚鼠制备多克隆抗体.[结论]成功制备了具有免疫原性的cap蛋白及其鼠源多克隆抗体,为猪细小病毒7型cap蛋白生物学功能及相关致病机制研究提供了基础材料.

关键词

猪细小蛋白/cap蛋白/克隆/原核表达/多克隆抗体

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基金项目

北京市农林科学院创新能力建设项目(KJCX201914)

出版年

2020
北京农学院学报
北京农学院

北京农学院学报

影响因子：0.539
ISSN：1002-3186
被引量5
参考文献量5
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