北京农学院学报2021，Vol.36Issue(3) ：78-82.DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2021.0314

布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法的建立

Establishment of real-time fluorescence quantitative PCR detection method for Brucella

巫秀红 刘庆斌 张永红 郭俊林 张玮 崔德凤
北京农学院学报2021，Vol.36Issue(3) ：78-82.DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2021.0314
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布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法的建立

Establishment of real-time fluorescence quantitative PCR detection method for Brucella

巫秀红 1刘庆斌 2张永红 1郭俊林 2张玮 2崔德凤1
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作者信息

  • 1. 北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室,北京102206
  • 2. 北京市动物疫病预防控制中心,北京102609
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摘要

[目的]根据DNA序列数据库上已公布的布鲁氏菌外膜蛋白(outer membrane protein,Omp)Omp 25基因,设计一对引物和荧光探针,通过反应体系优化,建立一种布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法.[方法]以构建的外膜蛋白目的片段重组质粒为标准品,验证该方法的灵敏度、特异性,通过优化反应条件,建立标准曲线.通过对34份已知临床背景的样品检测,验证该方法的敏感性.[结果]建立的布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法,特异性验证符合率100％,最低检测限约为100 copies/μL,敏感度的检出率为100％,建立标准曲线的R2为0.994,扩增效率99.73％.[结论]建立的布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于布鲁氏菌的检测.

关键词

布鲁氏菌/外膜蛋白Omp/25/荧光定量PCR

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基金项目

2020年常规与重大动物疫病临床诊断项目(20200211010349)

北京市生猪产业创新团队项目(BAIC02)

出版年

2021
北京农学院学报
北京农学院

北京农学院学报

影响因子：0.539
ISSN：1002-3186
被引量6
参考文献量7
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