北京农学院学报2022，Vol.37Issue(1) ：11-16.DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2022.0102

桃酵母双杂交cDNA文库的构建及生长素响应因子4互作蛋白的筛选

Construction of yeast two-hybrid cDNA library and screening of ARF4 interacting protein in the fruit of Prunus persica

郭振华 要宏阳 杨海清 王青 刁冬慧 刘悦萍
北京农学院学报2022，Vol.37Issue(1) ：11-16.DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2022.0102
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桃酵母双杂交cDNA文库的构建及生长素响应因子4互作蛋白的筛选

Construction of yeast two-hybrid cDNA library and screening of ARF4 interacting protein in the fruit of Prunus persica

郭振华 1要宏阳 1杨海清 2王青 1刁冬慧 1刘悦萍1
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作者信息

  • 1. 北京农学院生物与资源环境学院/农业农村部华北都市农业重点实验室,北京102206
  • 2. 北京市平谷区人民政府果品办公室,北京101200
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摘要

[目的]为解析桃果实发育成熟的机制,通过构建成熟期前后桃果实的酵母双杂交cDNA文库,筛选生长素响应因子4的互作蛋白,探究生长素响应因子4对桃果实成熟过程的调控作用.[方法]以硬溶质桃(Prunus persica L.)'突围'为材料,提取果皮的总RNA,建立酵母双杂交cDNA文库,采用Mating法筛选生长素响应因子4的互作蛋白.[结果]构建的酵母双杂交cDNA文库的总库容量1.6×107CFU,重组率100％,插入片段平均长度大于1 000 bp.构建诱饵载体pGADT7-PpARF4重组质粒,在桃果实酵母双杂交cDNA文库中筛选互作的靶蛋白,共获得有潜在互作的蛋白26个,主要功能涉及信号转导与胁迫响应、器官的形成、大分子代谢及蛋白合成与修饰因子.[结论]试验建立的酵母双杂交cDNA文库质量较高,完整性较好,为后续筛选果实成熟相关蛋白奠定基础.

关键词

桃/果实成熟/酵母双杂交cDNA文库/生长素响应因子4/酵母双杂交

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基金项目

北京农学院2020年本科生科研训练项目()

出版年

2022
北京农学院学报
北京农学院

北京农学院学报

影响因子：0.539
ISSN：1002-3186
被引量2
参考文献量3
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