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桃酵母双杂交cDNA文库的构建及生长素响应因子4互作蛋白的筛选

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[目的]为解析桃果实发育成熟的机制,通过构建成熟期前后桃果实的酵母双杂交cDNA文库,筛选生长素响应因子4的互作蛋白,探究生长素响应因子4对桃果实成熟过程的调控作用.[方法]以硬溶质桃(Prunus persica L.)'突围'为材料,提取果皮的总RNA,建立酵母双杂交cDNA文库,采用Mating法筛选生长素响应因子4的互作蛋白.[结果]构建的酵母双杂交cDNA文库的总库容量1.6×107CFU,重组率100％,插入片段平均长度大于1 000 bp.构建诱饵载体pGADT7-PpARF4重组质粒,在桃果实酵母双杂交cDNA文库中筛选互作的靶蛋白,共获得有潜在互作的蛋白26个,主要功能涉及信号转导与胁迫响应、器官的形成、大分子代谢及蛋白合成与修饰因子.[结论]试验建立的酵母双杂交cDNA文库质量较高,完整性较好,为后续筛选果实成熟相关蛋白奠定基础.
Construction of yeast two-hybrid cDNA library and screening of ARF4 interacting protein in the fruit of Prunus persica

郭振华、要宏阳、杨海清、王青、刁冬慧、刘悦萍

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北京农学院生物与资源环境学院/农业农村部华北都市农业重点实验室,北京102206

北京市平谷区人民政府果品办公室,北京101200

桃 果实成熟 酵母双杂交cDNA文库 生长素响应因子4 酵母双杂交

北京农学院2020年本科生科研训练项目

2022

10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2022.0102

北京农学院学报
北京农学院

北京农学院学报

影响因子：0.539
ISSN：1002-3186
年,卷(期)：2022.37(1)
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