北京农学院学报2022,Vol.37Issue(1) :56-60.DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2022.0110

一种改良的猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立

Establishment of an improved fluorescence quantitative PCR method for detection of porcine circovirus type 2

张鑫玉 吴琼 张涛 周波 温海京 崔德凤 张永红
北京农学院学报2022,Vol.37Issue(1) :56-60.DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2022.0110

一种改良的猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立

Establishment of an improved fluorescence quantitative PCR method for detection of porcine circovirus type 2

张鑫玉 1吴琼 1张涛 1周波 2温海京 1崔德凤 1张永红1
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作者信息

  • 1. 北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室,北京102206
  • 2. 河北农业大学动物科技学院,保定071000;中牧实业股份有限公司,北京100070
  • 折叠

摘要

[目的]利用SYBR Green Ⅰ荧光染料建立一种快速、灵敏的用于检测猪圆环病毒2型的荧光定量PCR方法.[方法]根据猪圆环病毒2型ORF2保守区的基因片段,扩增目的基因645 bp插入至PUC57载体,以重组质粒为模板进行荧光定量PCR反应条件优化及灵敏度、特异性等验证.[结果]建立的猪圆环病毒2型绝对定量检测方法与猪圆环病毒1型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪博卡病毒无交叉反应.检测猪圆环病毒2型的灵敏度是5.0×101 copies/μL,建立的标准曲线回归方程的相关系数0.999,扩增效率105.403%.[结论]成功建立一种特异性强、敏感性高、稳定性良好的绝对定量检测猪圆环病毒2型的荧光定量PCR方法,可以用于临床样品猪圆环病毒2型的检测.

关键词

猪圆环病毒2型/荧光定量PCR/绝对定量/检测

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基金项目

北京市生猪产业创新团队项目(BAIC02)

2018年度新型生产经营主体科技能力提升项目()

出版年

2022
北京农学院学报
北京农学院

北京农学院学报

影响因子:0.539
ISSN:1002-3186
被引量1
参考文献量7
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