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猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和高致病株双重RT-PCR检测方法的建立

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[目的]建立具有高敏感性能区分猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和高致病株的双重RT-PCR检测方法.[方法]首先从退火温度与引物浓度先对猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株、高致病株的单项RT-PCR方法的条件分别进行筛选与优化,然后对其双重RT-PCR方法的条件进行筛选与优化,并进行特异性与敏感性检测,最后初步应用于临床样品检测.[结果]建立的猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和高致病株双重RT-PCR检测方法不能检出猪流行性腹泻病毒和猪瘟病毒等当前流行较广的其他猪源RNA病毒,对猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株、高致病株的检测灵敏度分别是100、200copies/μL.此方法对2020-2021年8个猪场的220份血清样品的检测结果显示,猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株、高致病株的个体阳性率分别为7.73％和43.64％,与单项RT-PCR方法检测结果完全一致.[结论]建立了一种高敏感性的猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和高致病株双重RT-PCR检测方法.
Development of a duplex RT-PCR assay for the classical and highly pathogenic strains of porcine reproductive and respiratory syndrome virus

赵刘洋、李涵乔、芮雪、段燕方、贺晓霜、周双海

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北京农学院动物科学技术学院,北京102206

顺义区动物疫病预防控制中心,北京101300

猪繁殖与呼吸综合征病毒 经典株 高致病株 双重RT-PCR

北京高等学校高水平人才交叉培养实培计划-科研训练计划深化项目

PXM2020_014207_000009

2022

10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2022.0111

北京农学院学报
北京农学院

北京农学院学报

影响因子：0.539
ISSN：1002-3186
年,卷(期)：2022.37(1)
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