摘要
[目的]为了建立一种快速、准确、可靠的畜产品中单核细胞增生李斯特菌荧光定量PCR检测方法.[方法]根据保守序列设计并筛选出一对特异性引物,经过反应体系及程序优化,建立染料法qPCR检测方法,并使用临床样品评价该检测方法的效果.[结果]建立的qPCR方法特异性较好,扩增,对纯培养细菌的检测限可达到102 CFU/mL,检测方法变异系数小,稳定性高;对生猪肉和牛奶人工污染模型中的检测限为103 CFU/mL,比普通PCR灵敏度高10倍.使用qPCR分别对50份牛奶样品和生猪肉样品检测,阳性率均为2.00％,与普通PCR方法验证结果一致.[结论]成功建立一种特异性强、敏感性高、稳定性良好的绝对定量检测单核细胞增生李斯特菌的荧光定量PCR方法,可以用于临床样品单核细胞增生李斯特菌的检测.
基金项目
北京市优秀人才培养资助项目(2017000026833ZK18)
2019年北京市属高校高水平教师队伍建设支持计划青年拔尖人才培育计划(CIT&TCD201904052)
北京农学院青年科学基金(QNKJ202107)
2021年北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目(2021YJS030)
河北省教育厅青年基金(QN2017305)
维普
万方数据