摘要
[目的]探究CrGPAT在莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)油脂合成中的作用.[方法]通过RT-PCR方法克隆了莱茵衣藻CrGPAT基因,对其理化性质、信号肽、蛋白结构域、高级结构进行分析,构建系统发育树.采用荧光定量PCR检测CrGPAT基因表达量.[结果]结果表明,CrGPAT基因编码区全长为1 233 bp,共编码410个氨基酸.GPAT相对分子质量为102 kDa,等电点为4.94,平均疏水性为0.805,脂肪系数为17.85,分子式为C3536H5841N1233O1442S415,不稳定指数为45.30,属于不稳定蛋白质,为非分泌蛋白且不具有信号肽和蛋白跨膜区.二级结构预测表明CrGPAT蛋白由4种结构组成,其中α螺旋占43.17%,是CrGPAT蛋白最主要的二级结构.同时,系统发育分析表明,CrGPAT与团藻(Volvox)亲缘关系最近.[结论]CrGPAT能够在衣藻体内正常表达且在缺氮条件下表达量会显著提高,为进一步提高莱茵衣藻体内油脂量提供理论依据.
基金项目
北京市市属高等学校高水平教学创新团队建设支持计划(BPHR20220211)