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家蚕常用内参蛋白多克隆抗体的制备及应用比较分析

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内参基因是一种在所有组织和细胞中都表达的管家基因,常被用作基因和蛋白质功能研究中的参照.目前市场上商品化的内参抗体在家蚕中检测不稳定,制备高效、特异的可用于家蚕研究的内参抗体显得十分必要.对家蚕中常用的内参基因actin和tubulin进行克隆,构建其原核表达载体;通过原核表达和纯化,获得了纯度较高的融合蛋白;免疫新西兰大白兔后,成功制备了二者的多克隆抗体;酶联免疫吸附检测Actin抗体和Tubulin抗体的效价分别为1∶1000和1∶16000.Westernblot结果表明,制备的家蚕内参抗体不仅能特异结合家蚕蛋白,同时可有效检测其他昆虫及哺乳动物中的相应蛋白,且抗体制备简单,成本较低,从而增加了内参抗体的多样性和选择性,为后续家蚕蛋白的功能研究奠定了基础.
Preparation and Comparative Analysis of Polyclonal Antibody to Reference Proteins in Silkworm, Bombyx mori

王远卓、魏博帆、陈莹、杨娟娟、乔惠丽

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南阳师范学院农业工程学院,河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室,河南南阳473061

家蚕 肌动蛋白 微管蛋白 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 抗体

河南省教育厅高等学校重点科研项目河南省高等学校青年骨干教师项目南阳师范学院STP项目

17A1800312016GGJS-127STP2017024

2018

蚕业科学
中国蚕学会 中国农业科学院蚕业研究所

蚕业科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.58
ISSN：0257-4799
年,卷(期)：2018.44(6)
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