摘要
制备唐氏综合征细胞粘附分子2(DSCAM2)多克隆抗体,拟为DSCAM2功能探索提供免疫学工具.采用生物信息学方法对DSCAM2抗原结构进行分析;利用DNA重组技术构建DSCAM2828-957重组表达菌株;采用Ni亲和层析技术纯化重组DSCAM2828-957蛋白,免疫小鼠制备Anti-DSCAM2多克隆抗体;采用ELISA法检测抗体效价、Western Blot法检测抗体特异性、瑞氏-吉姆萨染色和免疫荧光检测DSCAM2在东亚飞蝗血淋巴细胞定位;采用siRNA敲低DSCAM2,进行血淋巴细胞计数.结果表明,所构建的pET30a(+)-DSCAM2828-957/BL21(DE3)原核菌株成功表达重组DSCAM2828-957蛋白;用Ni螯合亲和层析分离获得的DSCAM2828-957重组抗原免疫小鼠,获得了效价高且特异性好的DSCAM2多克隆抗体;细胞定位分析显示DSCAM2在东亚飞蝗嗜碱性粒细胞高表达;敲低DSCAM2表达水平,引起东亚飞蝗总血淋巴细胞数量增多.
国家科技期刊平台
NSTL
万方数据