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壳聚糖抗无乳链球菌引起的奶牛乳腺上皮细胞炎性反应

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本研究旨在研究壳聚糖(CTS)对无乳链球菌(S.agalactiae)引起的奶牛乳腺上皮细胞(bMECs)炎性反应的抑制作用和分子机制.试验用含不同浓度(0、15.625、31.250、62.500、125.000、250.000、500.000和1 000.000 mg/mL)CTS的脑心浸出液(BHI)培养基培养S.agalactiae,通过测定600 nm吸光度(OD)检测细菌活性;试验用含不同浓度(0、31.25、125.00和250.00 mg/mL) CTS的细胞培养基培养bMECs 24 h后,用S.agalactiae刺激细胞6h,使用荧光定量PCR的方法检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、Toll样受体2(TLR2)、髓样分化因子88(MyD88)、白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和转化生长因子激酶1(TAK1)的mRNA表达量,使用Western blot的方法检测核因子-κB抑制蛋白-α(IκB-α)、磷酸化核因子-κB-蛋白65(p-NF-κB-p65)、磷酸化蛋白38 (p-p38)、磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的蛋白表达量.结果 表明:1)CTS呈浓度依赖性抑制S.agalactiae的活性.2)S.agalactiae极显著提高了bMECs的IL-6、IL-1β、TNF-α和IL-8 mRNA表达量(P＜0.01);31.25、125.00和250.00 mg/mL的CTS显著或极显著降低了S.agalactiae诱导的bMECs的IL-6、IL-1β、TNF-α和IL-8 mRNA表达量(P＜0.05或P＜0.01).3)S.agalactiae极显著提高了bMECs的TLR2、MyD88、IRAK4、TRAF6和TAK1 mRNA表达量(P＜0.01);31.25、125.00和250.00 mg/mL的CTS显著或极显著降低了S.agalactiae诱导的bMECs的TLR2、MyD88、IRAK4、TRAF6和TAK1 mRNA表达量(P＜0.05或P＜0.01).4)S.agalactiae显著提高了bMECs的IκB-α、p-NF-κB-p65、p-p38和p-JNK蛋白表达量(P＜0.05);31.25、125.00和250.00 mg/mL的CTS显著或极显著降低了S.agalactiae诱导的bMECs的IκB-α、p-NF-κB-p65、p-p38、p-ERK1/2和p-JNK蛋白表达量(P＜0.05或P＜0.01).综上所述,CTS可以呈浓度依赖性抑制S.agalactiae活性.CTS通过抑制核因子-κB(NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的转导,减少了炎性细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和IL-8 mRNA表达,从而减弱S.agalactiae诱导的bMECs的炎性损伤作用.
Anti-Inflammatory Response of Chitosan in Bovine Mammary Epithelial Cells Induced by Streptococcus agalactiae

孙铭维、童津津、蒋林树、熊本海、毛胜勇

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北京农学院动物科学技术学院,奶牛营养学北京市重点实验室,北京102206

中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193

南京农业大学动物科学技术学院,南京210014

壳聚糖 无乳链球菌 奶牛乳腺上皮细胞 炎性反应

“十三五”国家重大科技专项国家自然科学基金北京市博士后基金

2017YFD070160431802091

2020

动物营养学报
中国畜牧兽医学会

动物营养学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.297
ISSN：1006-267X
年,卷(期)：2020.32(3)
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