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miR?146b过表达对脂多糖刺激仔猪肠上皮细胞Toll样受体4基因表达和促炎因子产生的影响

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本研究旨在探讨miR⁃146b过表达对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠上皮细胞(IPEC⁃J2细胞)Toll样受体4(TLR4)基因表达和促炎因子产生的影响.首先利用LPS刺激IPEC⁃J2细胞,然后使用荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测LPS刺激对IPEC⁃J2细胞中TLR4和促炎因子白细胞介素-1β(IL⁃1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF⁃α)、白细胞介素-6(IL⁃6)、白细胞介素-8(IL⁃8)和干扰素-γ(IFN⁃γ)等的mRNA表达以及对分泌到细胞培养液中促炎因子含量的影响.在此基础上,通过miR⁃146b mimic细胞转染试验,探讨miR⁃146b过表达对LPS刺激的IPEC⁃J2细胞中TLR4的mRNA表达和促炎因子产生的抑制作用.结果表明:1)与未刺激处理相比,LPS刺激处理的IPEC⁃J2细胞中TLR4、IL⁃1β、TNF⁃α、IL⁃8和IFN⁃γ的mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01),细胞培养液中TNF⁃α、IL⁃8和IFN⁃γ含量极显著升高(P<0.01).2)与LPS处理相比,LPS+miR⁃146b mimic处理的miR⁃146b的相对表达量极显著升高(P<0.01),IPEC⁃J2细胞中TLR4、TNF⁃α、IL⁃8和IFN⁃γ的mRNA相对表达量分别显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞培养液中TNF⁃α、IL⁃8和IFN⁃γ含量极显著降低(P<0.01).由此可见,miR⁃146b在LPS刺激的IPEC⁃J2细胞中可通过抑制促炎因子的产生发挥抗炎作用.
Effects of miR⁃146b Over⁃Expression on Toll⁃Like Receptor 4 Gene Expression and Generation of Pro⁃Inflammatory Cytokines in Intestinal Epithelial Cells of Piglets Stimulated by Lipopolysaccharide

陶新、邓波、门小明、刘淑杰、徐子伟

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浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,杭州 310021

脂多糖 miR⁃146b 仔猪 肠上皮细胞 促炎因子

浙江省重点研发计划浙江省重点研发计划现代农业产业技术体系建设项目

2021C020072021C02068?3CARS?35

2023

动物营养学报
中国畜牧兽医学会

动物营养学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:1.297
ISSN:1006-267X
年,卷(期):2023.35(1)
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