本试验旨在研究丁酸梭菌及其胞外囊泡对小鼠结肠炎的缓解作用以及对肠道真菌结构的影响.试验选用8周龄雄性C57BL/6J小鼠24只,随机分为4组,每组6只.Control组、DSS组、CB组和EV组分别给予正常饮水并灌胃200 μL/d生理盐水、3％葡聚糖硫酸钠(DSS)饮水并灌胃200 μL/d生理盐水、3％DSS饮水并灌胃200 μL/d 丁酸梭菌溶液(5× 108 CFU/mL)、3％DSS饮水并灌胃50 μg/d 丁酸梭菌胞外囊泡(溶于200 μL生理盐水),7 d后各组饮水均换为正常饮水.于第11天停止灌胃,对小鼠进行眼球取血,收集血清,测定炎症因子含量;随后麻醉处死小鼠,解剖后收集结肠组织及其内容物,进行组织病理学分析和真菌测序分析.结果显示:1)相对于Control组,DSS组小鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和脂多糖(LPS)的含量显著提高(P＜0.05),白细胞介素-10(IL-10)的含量显著下降(P＜0.05).相对于DSS组,CB组和EV组小鼠血清中IL-6、TNF-α 和LPS的含量显著下降(P＜0.05),IL-10的含量有所提高(P＞0.05).2)经DSS处理的小鼠结肠真菌菌群操作分类单元(OTU)数量、Chao1指数和Shannon指数较Control组显著增加(P＜0.05),而灌胃丁酸梭菌或其胞外囊泡使结肠炎小鼠结肠真菌菌群的OTU数量和Chao1指数减小,趋于Control组.在门水平上,DSS处理小鼠结肠中子囊菌门(Ascomycota)的相对丰度下降,担子菌门(Basidiomy-cota)的相对丰度增加;在属水平上,DSS处理小鼠结肠中哈萨克斯坦酵母属(Kazachstania)的相对丰度下降,枝孢菌属(Cladosporium)、锥盖伞属(Conocybe)和青霉菌属(Penicillium)的相对丰度增加,而灌胃丁酸梭菌或及其胞外囊泡能使这些真菌门和真菌属的相对丰度趋于正常.3)斯皮尔曼相关性分析发现,DSS诱导的结肠炎小鼠结肠中暗梗单孢霉属(Chloridium)、帚霉属(Scopulariopsis)、Conocybe 和丝孢菌属(Scedosporium)的相对丰度与血清中 IL-6、TNF-α 和 LPS的含量呈显著或极显著正相关(P＜0.05或P＜0.01),与血清中IL-10含量呈极显著负相关(P＜0.01);而结肠中Kazachstania的相对丰度与血清中IL-6、TNF-α和LPS的含量呈显著或极显著负相关(P＜0.05或P＜0.01),与血清中IL-10的含量呈极显著正相关(P＜0.01).综上所述,丁酸梭菌及其胞外囊泡能通过调节小鼠的肠道真菌菌群结构对DSS诱导的肠道黏膜损伤和炎症产生缓解作用.
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