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蛋氨酸二肽对Transwell小室培养的奶牛乳腺上皮细胞中乳蛋白合成的影响

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为明确奶牛乳腺中小肽的吸收和利用机制,本试验研究了蛋氨酸二肽(Met-Met)在Transwell小室培养的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)中的摄取及其对乳蛋白合成的影响.首先将BMECs培养在Transwell小室中,待BMECs形成细胞层后,分别在Transwell上室和下室培养液中添加0.5 mmol/L的Met-Met,以不添加Met-Met作为对照.培养24 h后,收集BMECs,采用Western blot检测β-酪蛋白(β-casein)和小肽转运载体2(PepT2)蛋白的相对表达量以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)和蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平.结果显示:BMECs在Transwell小室中培养6 d后,细胞层跨膜电阻达到平台期,反映细胞层紧密性良好;Transwell上室和下室培养液中添加Met-Met显著增加了 BMECs中β-casein和PepT2的蛋白相对表达量(P＜0.05);Transwell下室培养液中添加Met-Met显著提高了 mTOR、S6K1和AKT蛋白的磷酸化水平(P＜0.05).以上结果表明,Transwell上室和下室培养液中的Met-Met 均可被BMECs摄取用于乳蛋白的合成,PepT2在BMECs基底膜小肽吸收和顶膜小肽重吸收过程中发挥重要作用,基底膜Met-Met通过激活mTOR和AKT信号通路促进乳蛋白的合成.
Effects of Methionyl-Methionine on Milk Protein Synthesis in Transwell Chamber Cultured Bovine Mammary Epithelial Cells

bovine mammary epithelial cellsMet-MetTranswell chambermilk protein synthesis

祁业辉、黄飞、杜心怡、刘桂芹、王长法、周苗苗

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聊城大学农学与农业工程学院,聊城 252000

奶牛乳腺上皮细胞 蛋氨酸二肽 Transwell小室 乳蛋白合成

国家自然科学基金山东省大学生创新创业训练计划聊城大学大学生创新创业训练计划聊城大学畜牧学开放课题

31902177S202210447012CXCY2022102319462207-9

2023

10.12418/CJAN2023.553

动物营养学报
中国畜牧兽医学会

动物营养学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.297
ISSN：1006-267X
年,卷(期)：2023.35(9)
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