本试验首先通过脂多糖(LPS)诱导建立小鼠乳腺炎模型,然后在此基础上研究褪黑素(MT)对小鼠乳腺炎的防治作用.小鼠乳腺炎模型的建立:选取14只健康的产后7～14 d的母鼠,随机分为对照组和LPS组(每组7只).LPS组母鼠在第4对乳腺导管灌注50 μL 0.2 mg/mL的LPS,LPS诱导24 h后采集其血液及乳腺组织样品,测定血清及乳腺组织中促炎细胞因子含量.MT对小鼠乳腺炎的防治作用:选取56只健康的产后3～5 d的母鼠,随机分为4组,每组14只.空白对照组和模型组每日灌胃0.2 mL生理盐水,MT低、高剂量组每日分别按照1、2 mg/kg BW的剂量灌胃MT(溶于0.2 mL生理盐水).共灌胃14 d,分别于第7、14天灌胃4 h后,从模型组以及MT低、高剂量组各挑选7只小鼠按照上述方法构建乳腺炎模型,LPS诱导24 h后采集血液及乳腺组织样品,观察乳腺组织病理学变化,并测定血清中炎性细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)与白细胞介素-10(IL-10)]和抗氧化指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)]的含量或活性.结果显示:1)与对照组相比,LPS组血清及乳腺组织中TNF-α、IL-6、IL-1β含量极显著升高(P＜0.01),IL-10含量极显著降低(P＜0.01),说明在小鼠第4对乳腺两侧的乳腺导管各灌注50 μL浓度为0.2 mg/mL的LPS可以成功建立小鼠乳腺炎模型.2)乳腺组织病理组织学变化显示,MT减轻了 LPS诱导的小鼠乳腺组织的损伤程度.3)灌胃7或14 d后,MT极显著降低LPS诱导的小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的含量(P＜0.01),并极显著提高IL-10的含量(P＜0.01).4)灌喂7或14 d后,MT极显著增强LPS诱导的小鼠血清中SOD、GSH-Px与CAT活性(P＜0.01),并极显著降低MDA含量(P＜0.01).综上所述,MT可以抑制促炎细胞因子的分泌,促进抗炎细胞因子的分泌,增强抗氧化酶的活性,从而缓解L P S对小鼠乳腺组织造成的损伤.
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