首页|尿嘧啶DNA糖苷酶防止PCR产物污染及其对核酸杂交的影响

尿嘧啶DNA糖苷酶防止PCR产物污染及其对核酸杂交的影响

Prevention of contamination in PCR products by using uracil-DNA-glycosylase before amplification and its influence on nucleic acid hybridization

扫码查看
原文链接
  • 国家科技期刊平台
  • NETL
  • NSTL
  • 维普
  • 万方数据
目的采用PCR微板核酸杂交ELISA技术分析尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG/UDG)防止PCR产物污染及其对PCR扩增效率的影响,探讨在不同A/T含量的微生物中含尿嘧啶的PCR产物对核酸杂交的影响.方法以3组dUTP含量不同的PCR产物作模板,抗污染组用UNG处理,直接进行再次扩增.用微板核酸杂交ELISA检测第二次PCR扩增的结果. 结果抗污染组中以含dUTP的PCR产物作模板,结果为阴性;而以不含dUTP的PCR产物作模板,结果为阳性.非抗污染组全部为阳性.对3组PCR产物再进行核酸杂交无明显差别,且在一定温度内,3组具有同样的稳定性. 结论 UNG能有效降解含dUTP的PCR产物,使之不能作为模板再次扩增,可以有效地防止PCR产物的污染.含有尿嘧啶的PCR产物对寡核苷酸探针的杂交无影响.

王省良、周东耀、王丽之、万成松、曾位森、彭华国、王虹

展开 >

第一军医大学,生物医学诊断研究心,广东,广州,510515

第一军医大学,珠江医院检验科,广东,广州,510282

尿嘧啶 脱氧核糖核酸酶类 糖苷水解酶类 聚合酶链反应 抗污染 核酸杂交

2000

南方医科大学学报
南方医科大学

南方医科大学学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.654
ISSN：1673-4254
年,卷(期)：2000.20(4)
  • 1
  • 7