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山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的表达及其多克隆抗体的制备和特性分析

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[目的] 明确山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)SU蛋白的功能.[方法] 采用RT-PCR方法从ENTV-2FJ分离株中扩增获得SU基因片段,将其克隆到Pmd-19T载体;测序验证后,再亚克隆到PET-32a(+)上,在RosettagamiB(DE3) 感受态细胞进行表达,采用SDS-PAGE 、Western-blot和ELISA对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析.[结果] 结果显示,表达的重组菌融合蛋白大小约64.38 Kd,在IPTG终浓度0.4 mmol·L-1、37 ℃诱导4 h表达效果最好.用纯化的ENTV-2进行SDS-PAGE,SU重组蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体作为一抗,进行Western-blot,结果显示鼠抗SU蛋白多克隆抗体能与ENTV-2抗原进行特异性的反应.[结论] 表达的SU蛋白有较好的抗原性,为制备ENTV-2特异性单克隆抗体及建立ENTV-2特异性血清学方法奠定了基础.
Expression of SU protein of ENTV-2FJ strain, preparation and characterstic analylsis of its polyclonal antibody

江锦秀、张靖鹏、林裕胜、游伟、胡奇林

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福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建 福州 350013

山羊地方性鼻内肿瘤病毒 表面蛋白 原核表达 多克隆抗体

福建省科技重大专项福建省科技计划公益类项目

2019NZ090072018R1023-1

2021

10.19303/j.issn.1008-0384.2021.02.001

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2021.36(2)
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