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牛病毒性腹泻/黏膜病病毒荧光定量PCR检测方法的建立

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[目的] 设计一种能够快速检测出牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)的方法.[方法] 依据GenBank公布的B V D V 5′U T R基因属于特异性保守区域的前提,构建具有特异性的探针和引物,以体外转录病毒RNA作为绝对定量标准品.对荧光定量RT-PCR方法的各反应条件进行优化,创建BVDV荧光定量PCR检测方法.[结果] 5.0267 copies·μL−1是此检测方法的最低下限值,该方法拥有良好的重复性,变异系数在组内、组间均<1%.特异性较高,对其他病毒核酸的扩增均为阴性,如猪瘟病毒、口蹄疫病毒等.[结论] 建立的BVDV荧光定量PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,为牛病毒性腹泻的早期诊断提供了重要的技术支撑.
A RT-PCR Assay for Quantitative Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus

张康、郭志廷、仇正英、张景艳、王磊、张凯、王贵波、梁芬芬、马倩、李建喜

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中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创新重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室,甘肃 兰州 730050

甘肃农业大学动物医学院,甘肃 兰州 730050

牛病毒性腹泻病毒 5'UTR 实时荧光定量PCR RNA标准品

国家现代农业产业技术体系建设项目甘肃省青年科技基金计划中国农业科学院科技创新工程协同创新项目中兽医与临床科技创新工程项目

CARS3621JR7RA030CAAS-XTCX2016011-01-09CAAS-ASTIP-2015-LIHPS

2021

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.656
ISSN:1008-0384
年,卷(期):2021.36(9)
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