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龙眼DlAGOMEL1基因的克隆表达及亚细胞定位分析

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[目的]探究DlAGOMEL1基因在龙眼体胚发生过程中的调控作用,并明确该基因在亚细胞中的定位,为深入研究DlAGOMEL1基因的功能提供理论依据.[方法]采用RT-PCR技术,基于龙眼基因组数据库,克隆DlAGOMEL1基因的CDS及该基因的5'端上游启动子序列,采用生物信息学方法分析该基因,通过实时荧光定量PCR技术检测其在龙眼体胚不同发育阶段的相对表达量,同时,构建该基因的瞬时融合表达载体,得到重组质粒,并将其瞬时转入洋葱内表皮细胞中,用荧光共聚焦显微镜观察细胞绿色荧光信号.[结果]获得DlAGOMEL1基因CDS全长序列及5'端上游启动子序列长度分别为2655 bp、1512 bp,该基因编码884个氨基酸;系统进化树分析表明,龙眼DlAGOMEL1蛋白与胡杨亲缘关系最近,与单子叶植物水稻、玉米等亲缘关系最远;实时荧光定量分析表明,该基因在龙眼体胚不同阶段均表达,在子叶胚时期(CE)的相对表达量较高,而在球形胚时期(GE)的相对表达量最低.亚细胞定位结果发现,DlAGOMEL1基因定位于细胞质中.[结论]DlAGOMEL1基因在龙眼体胚阶段的相对表达量呈"V"字型,可能主要参与龙眼晚期体胚发生的转录调控过程,在细胞质中发挥主要的功能作用.
Cloning, Expression and Subcellular Localization of DlAGOMEL1 from Longan

陈荣珠、王小平、林美珍、赖钟雄

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漳州卫生职业学院药学系,福建 漳州 363000

福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建 福州 350002

龙眼 DlAGOMEL1基因 表达分析 亚细胞定位

漳州市自然科学基金漳州卫生职业学院高学历人才科研支持专项漳州卫生职业学院科技创新团队培育项目漳州卫生职业学院科技创新团队培育项目福建农林大学科技创新专项基金

ZZ2021J16ZWYGXL202101Kjcx-3Kjcx-5CXZX2017189

2021

10.19303/j.issn.1008-0384.2021.10.008

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2021.36(10)
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