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木尔坦棉花曲叶病毒编码4个蛋白的抗血清制备

Preparation of Antisera Against Four Proteins Encoded by Cotton Leaf Curl Multan Virus

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[目的]对入侵我国的木尔坦棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl Multan virus,CLCuMuV)编码的V1、V2、C1和C4蛋白抗血清进行制备,为CLCuMuV的检验检疫及其致病机制的研究奠定基础.[方法]利用原核表达技术对V1、V2、C1和C4蛋白进行IPTG诱导表达,western blot分析表达蛋白的特异性后,V1、V2、C1蛋白免疫新西兰大白兔,C4蛋白免疫小白鼠制备抗血清,利用western blot对抗血清的特异性进行分析.[结果]通过PCR分别扩增V1(768 bp)、V2(363 bp)、C1(1089 bp)和C4(300 bp)目的基因片段,分别连接于原核表达载体后,通过SDS-PAGE和western blot分析分别在34、16、44、13 kDa处存在与预期蛋白大小一致的条带,表明该4种蛋白均成功表达.Western blot分析发现获得的4种抗血清均具有较高的特异性.[结论]成功制备了CLCuMuV V1、V2、C1和C4蛋白的抗血清,可用于后续建立CLCuMuV的检疫方法及研究其致病机制.

林丹、林文忠、尚鹏祥、林文武、丁新伦、吴祖建、张洁

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福建农林大学植物病毒研究所/福建农林大学闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室,福建 福州 350002

棉花 木尔坦棉花曲叶病毒 原核表达 免疫印迹 抗血清

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2019J01656CXZX2020017ACXZX2019018GCXZX2018099

2021

10.19303/j.issn.1008-0384.2021.11.014

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2021.36(11)
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