茉莉花JsMYB305转录因子的原核表达及蛋白纯化

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中文摘要：[目的]获得茉莉花香气调控转录因子JsMYB305的重组蛋白,为深入研究JsMYB305调控茉莉萜类香气代谢的分子机理及筛选其他互作蛋白提供基础.[方法]通过酶切连接的方式,将JsMYB305的编码序列构建到原核表达载体pGEX-4T-1,转化BL21(DE3)表达菌株,通过IPTG诱导蛋白表达、GST亲和树脂分离纯化,最后Western Blot鉴定重组蛋白.[结果]重组蛋白的诱导条件为0.2 mmol·L?1 IPTG,最适宜纯化的温度和时间为28℃诱导4 h,经20 mmol·L?1 GSH洗脱的蛋白纯度较好,Western Blot结果表明重组蛋白的大小正确.[结论]成功获得了JsMYB305重组蛋白,为后期利用GST-pull down技术筛选互作蛋白及EMSA研究JsMYB305对特定启动子位点的结合提供基础.

外文标题：Prokaryotic Expression and Purification of JsMYB305 Transcription Factor in Jasminum sambac

作者：

万超、张月、胡莉、伍炳华、袁媛

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作者单位：

福建农林大学园艺学院,福建福州 350002

关键词：

茉莉花 MYB转录因子原核表达蛋白纯化

基金：

国家自然科学基金福建农林大学科技创新专项

项目编号：

31902050CXZX2020025A

出版年：

2022

DOI：

10.19303/j.issn.1008-0384.2022.002.005

福建农业学报

福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心

影响因子：0.656

ISSN：1008-0384

年,卷(期)：2022.37(2)

参考文献量17