[目的]从不同品种烟叶原料中分离筛选高产纤维素酶细菌菌株,为提高烟叶原料使用价值提供优秀菌种资源.[方法]采用稀释涂布法从37份片烟样品中分离纯化菌株,利用刚果红染色法结合摇瓶复筛进行筛选,测定菌株纤维素酶活性,通过形态学观察与16S rRNA序列鉴定功能菌的系统发育学地位,并对功能菌所产纤维素酶进行酶学性质研究.[结果]筛选到1株烟用纤维素酶活性高的菌株FX-1,其在37 ℃发酵48 h纤维素酶酶活力最高,达56.261 U·mL−1.FX-1菌体呈杆状,可产芽孢,革兰氏阳性,其16S rRNA序列与Bacillus subtilis相似度最高(100％),系统发育树中与枯草芽孢杆菌位于同一分支中,初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).通过酶学性质分析,酶反应的最适温度为60 ℃,最适pH为5.0,在温度30～55 ℃或pH值3.0～7.0保温30 min后仍有较高活力,相对酶活有90％以上,具有良好的热稳定性和耐酸能力.[结论]从37份片烟样品中筛选获得1株高产纤维素酶菌株FX-1,初步鉴定为枯草芽孢杆菌.FX-1所产纤维素酶的反应条件较宽,酶学性质稳定,在烟草行业中具有良好的产业化开发利用前景.
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