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荷花NnWRKY22基因的克隆与表达分析

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[目的] 克隆荷花(Nelumbo nucifera)NnWRKY22基因,分析该基因在荷花根、茎、叶、花中的表达模式及不同天数铜胁迫处理下的表达情况,为进一步研究该基因功能和荷花抗铜胁迫机制奠定基础.[方法] 采用RT-PCR方法从荷花cDNA中克隆得到NnWRKY22基因,利用Prot Param等工具对NnWRKY22氨基酸序列进行分析,利用qRT-PCR方法分析NnWRKY22组织表达特异性以及在铜胁迫下表达量的变化.[结果] 成功克隆得到荷花NnWRKY22基因,该基因ORF全长573 bp,编码190个氨基酸,含有1个保守的WRKY结构域.该蛋白理论分子量、等电点、不稳定系数和亲水性指数分别为:21.33 kDa、 9.03、71.93和−0.692,属于不稳定的亲水性蛋白.进化树分析表明荷花与洛矶山耧斗菜(Aquilegia coerulea)和博落回(Macleaya cordata)亲缘关系较近.qPCR结果表明,NnWRKY22在荷花的根、茎、叶、花中均有表达,但具有组织表达特异性,在根中表达量最高,花中表达量最低.NnWRKY22基因在铜胁迫下表达增强,胁迫7 d表达量达到最高值.[结论] 克隆了荷花NnWRKY22基因,该基因在荷花中特异性表达,在根中表达量最高.NnWRKY22在铜胁迫下表达增强,推测该基因在荷花抗铜胁迫中发挥重要作用.
Cloning and Expression of NnWRKY22 in Lotus

王婉茹、刘莹、刘红利、贺丹、刘艺平、孔德政

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河南农业大学风景园林与艺术学院,河南 郑州 450002

河南省优质花卉蔬菜种苗工程研究中心,河南 郑州 450002

荷花 NnWRKY22基因 表达分析 抗铜性

国家自然科学基金河南省高等学校重点研究项目河南农业大学科技创新基金

3160056821A220003KJCX2017C01

2022

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.656
ISSN:1008-0384
年,卷(期):2022.37(4)
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