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羊口疮病毒115基因的克隆及原核表达

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[目的]获得羊口疮病毒(ORFV)115基因表达蛋白.[方法]利用Oligo 7软件设计并筛选出115基因特异性扩增引物,以ORFV FJ-ND株基因组为模板,通过PCR技术扩增获得其基因序列,再将115基因克隆至pGEX-6p-1上,重组质粒pGEX-6p-115,并对其进行测序鉴定,鉴定正确后转化RosettaganmiB(DE3)感受态细胞,通过优化IPTG浓度和诱导时间获得重组融合蛋白最佳表达条件,用SDS-PAGE对表达的目的蛋白进行分析.[结果]115基因全长450 bp,编码149个氨基酸;115基因可以在RosettaganmiB中表达,重组蛋白分子大小约42 kDa,主要以包涵体形式表达.[结论]成功克隆了ORFV 115基因,构建了pGEX-6P-115原核表达质粒,优化了重组蛋白表达条件并进行纯化,为进一步探索ORFV 115蛋白在感染宿主过程中的机制和作用奠定基础.
Cloning and Prokaryotic Expression of ORFV 115 Gene

林裕胜、黄丽丽、江锦秀、张靖鹏、刘维巍、刘庆华、胡奇林

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福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建 福州 350013

新疆生产建设兵团第十一师第五中学,新疆 乌鲁木齐 830000

福建农林大学动物科学学院,福建 福州 350002

羊口疮病毒 115基因 克隆 原核表达

XTCXGC20210082021R10260072021J01484CXTD2021007-2

2022

10.19303/j.issn.1008-0384.2022.007.005

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2022.37(7)
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