低温胁迫下山葡萄叶片酵母cDNA文库构建

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中文摘要：[目的]葡萄栽培过程中,由低温造成的冷害或冻害严重影响葡萄的生长发育、果实品质和产量.山葡萄是葡萄抗寒育种的重要种质资源,本文通过构建低温胁迫下山葡萄叶片酵母cDNA文库,为葡萄抗寒分子机理研究提供物质基础.[方法]以抗寒山葡萄左山-1(V.amuerensiscv.Zuoshan-1)扦插盆栽苗为材料,提取4℃低温处理0、2、4、8、12、24 h后叶片总RNA,采用SMART技术反转录为cDNA,经纯化和短片段去除后克隆至pGADT7三框质粒载体上,经过纯化后获得初级cDNA文库,对初级文库进行扩增、提取文库质粒后转入酵母Y187菌株中,制作扩增的酵母文库,并对文库质量进行鉴定.[结果]经检测所构建的3个读码框初级文库库容分别为1.7×106、2.0×106和1.9×106 cfu,重组率为100％,插入的片段长度主要分布在500～2000 bp;电泳检测和测序结果表明,插入片段所对应的编码蛋白类型丰富,具有良好的多态性.最终获得的Y187酵母文库滴度为4.0×108 cfu·mL−1.[结论]构建的低温胁迫下山葡萄叶片酵母cDNA文库质量较高,为筛选山葡萄低温胁迫下的互作蛋白提供了材料基础.

外文标题：Construction of Yeast cDNA Library Using Vitis amurensis Leaves Under Low-temperature Stress

作者：

马登辉、马红义、李承男、虎志瑞、丁小雨、梁敏、尹晓

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作者单位：

宁夏大学农学院,宁夏银川 750021

关键词：

山葡萄酵母cDNA文库低温非生物胁迫

基金：

项目编号：

2022AAC030102022BBF03004S202210749076

出版年：

2022

DOI：

10.19303/j.issn.1008-0384.2022.009.008

福建农业学报

福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心

影响因子：0.656

ISSN：1008-0384

年,卷(期)：2022.37(9)

参考文献量7