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鳗鲡疱疹病毒与鳗鲡圆环病毒双重PCR检测方法的建立

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[目的]建立能同时检测鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AHV)与鳗鲡圆环病毒(Eel circovirus,EeCV)的双重PCR法.[方法]优选PCR引物组合,建立鳗鲡疱疹病毒与鳗鲡圆环病毒的双重PCR检测方法,探究双重PCR扩增条件,并检验该方法的特异性、灵敏性和临床样品检测效果.[结果]双重PCR法同时扩增出鳗鲡疱疹病毒690 bp和鳗鲡圆环病毒338 bp特异性片段,与猪圆环病毒(Porcine circovirus)、鸭圆环病毒(Duck circovirus)、锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus)和鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirus)的核酸不发生扩增反应.鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒重组质粒标准品的最低全检出量为5.0×10-4μg·mL-1.用所建立的双重PCR方法对50份临床病鳗进行检验,其中鳗鲡疱疹病毒的感染率为16％,鳗鲡圆环病毒的感染率为68％,共感染率为8％.该感染率与单一PCR检测结果完全一致.[结论]建立的鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒双重PCR检测法不仅特异性强、灵敏度高、重复性好,而且临床应用效果佳,为鳗鲡疱疹病毒和鳗鲡圆环病毒的快速检测提供了有效的技术支持.
Establishment and application of duplex PCR detection system between Anguillid herpesvirus and Eel circovirus

林而舒、卓玉琛、陈斌、林煜、钟全福、樊海平、曾占壮

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福建省淡水水产研究所,福建 福州 350002

鳗鲡疱疹病毒 鳗鲡圆环病毒 双重PCR 检测方法

2022R11010014-52023R11010017-4

2022

10.19303/j.issn.1008-0384.2022.011.004

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2022.37(11)
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