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南方根结线虫MiPDCD6基因多克隆抗体的制备

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[目的]制备针对南方根结线虫食道腺蛋白MiPDCD6多克隆抗体,为进一步研究南方根结线虫MiPDCD6蛋白的致病机制提供技术支持和材料准备.[方法]将扩增MiPDCD6基因的功能片段,与原核表达质粒pET-32a(+)构建重组质粒pET-32a-MiPDCD6,然后将重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞进行诱导表达;将纯化的根结线虫MiPDCD6融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔,获得高效价高纯度的多克隆抗体.[结果]构建的重组质粒pET-32a-MiPDCD6转化大肠杆菌BL21细胞后,在诱导剂IPTG浓度1.0 mmol·L−-1、摇床温度37℃、转速150 r·min−−1和振荡培养5 h条件下,成功表达MiPDCD6融合蛋白.ELISA和SDS-PAGE检测表明:将纯化的根结线虫MiPDCD6融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔,获得高效价高纯度的多克隆抗体,效价约为1:50000.[结论]明确了MiPDCD6基因原核表达条件;制备获得的根结线虫MiPDCD6蛋白的多克隆抗体效价和纯度较高,可用于后续研究MiPDCD6蛋白在南方根结线虫致病机理中发挥的功能.
Preparation of Polyclonal Antibody against MiPDCD6 Protein in Meloidogyne incognita

陈晨、高永峰、王新荣、袁永强、蔡书静、刘松松、叶雯华、王燕

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华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室,广东 广州 510642

MiPDCD6 多克隆抗体 南方根结线虫 效价

广东省基础与应用基础研究基金国家自然科学基金国家自然科学基金

2019A15150120803117182530771409

2023

10.19303/j.issn.1008-0384.2023.03.008

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2023.38(3)
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