[目的]对T0-T3 代转基因植株进行抗草甘膦EPSPS基因的筛选检测,以期得到遗传稳定的转基因株系.[方法]利用花粉管通道法将EPSPS基因转入优良自交系京 92中,通过田间草甘膦筛选和分子检测鉴定外源基因在世代间的遗传表达.[结果]在田间用 200 mg·L-1 的草甘膦除草剂筛选,T0 代 15个抗性植株经PCR鉴定,共获得 10个阳性植株,转化率为 1.03%;对各株系从T1 代到T3 代逐代筛选淘汰,株系内阳性株数逐渐增多,在T3 代5个株系中分离出K3和K8两个整合了EPSPS外源基因的稳定遗传株系;进一步对K3和K8两个株系的T3 代采用试纸条进行功能表达分析,发现目的基因均能正常表达.[结论]K3和K8两个转基因玉米株系后期可作为培育耐草甘膦的基础材料.