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龙眼DlAGO4和DlAGO6启动子的克隆及活性分析

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[目的]Argonaute(AGO)蛋白是RNA介导的沉默复合物RISC的核心成分,参与植物生长发育、组织形成、细胞增殖凋亡、病毒防御、逆境响应等多种生物过程.探究龙眼DlAGO4和DlAGO6基因启动子区域的顺式作用元件,以及重组表达载体在不同激素处理下的表达模式,可为进一步研究DlAGO4和DlAGO6基因的功能提供参考.[方法]使用常规PCR技术克隆龙眼DlAGO4和DlAGO6基因启动子序列,采用BPDG、PLACE和PlantCARE等生物信息学工具进行DlAGO4和DlAGO6基因启动子序列的生物信息学分析,并构建全长启动子与GUS基因融合表达载体,转化烟草叶片,进行瞬时表达,通过GUS组织化学染色分析启动子的活性.[结果]DlAGO4基因启动子片段长度 1514 bp,DlAGO6基因启动子片段长度 1784 bp.两个启动子序列均含有TATA-box和CAAT-box核心元件、茉莉酸甲酯、脱落酸和光响应元件;DlAGO4启动子序列还含有水杨酸、赤霉素响应元件和厌氧应答调控元件;DlAGO6启动子序列还含有生长素及昼夜节律调控元件.2个启动子片段均可驱动GUS基因表达,表达强度弱于 CaMV35S.MeJA和 ABA处理可显著提高转 DlAGO6启动子烟草叶片中 GUS基因的相对表达水平,SA和MeJA处理可提高转DlAGO4启动子烟草叶片GUS基因的相对表达水平.[结论]成功克隆了龙眼DlAGO4和DlAGO6基因启动子,二者为激素诱导型启动子,具有驱动下游GUS表达的活性,可能参与了植物体胚发育以及对激素的响应.
Cloning and Activity of DlAGO4 and DlAGO6 Promoters from Dimocarpus longan

Dimocarpus longanDlAGO4DlAGO6promoterGUS activity

陈荣珠、赖钟雄

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漳州卫生职业学院,福建 漳州 363000

福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建 福州 350002

龙眼 DlAGO4 DlAGO6 启动子 GUS活性

福建省(山区)作物遗传改良与创新利用重点实验室开放课题漳州卫生职业学院科技创新团队项目国家自然科学基金

2022SKF04Kjcx-531572088

2023

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2023.38(5)
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