鲤疱疹病毒2型与3型双重PCR检测方法的建立与应用

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中文摘要：[目的]鲤疱疹病毒 2型和 3型对鲤科鱼类危害严重,本研究旨在建立快捷、高效且能同时检测 2种鲤疱疹病毒的检测技术.[方法]根据鲤疱疹病毒 2 型和 3型的DNA聚合酶基因保守序列,设计 2对特异性引物,通过对双重PCR反应条件的优化,建立检测鲤疱疹病毒 2型和 3型的双重PCR方法;使用该方法对试验室保存的鲫和鲤病鱼组织样品进行检测.[结果]该方法能够分别对鲤疱疹病毒 2型和鲤疱疹病毒 3型各扩增出 715 bp和 456 bp的特异性条带,表现出良好的特异性;敏感性试验结果显示,该方法的检测极限值为 100 copies·μL-1,具有较高的灵敏性.使用该方法对本试验室保存的 18份临床病料进行PCR检测并对PCR产物进行测序验证,结果显示CyHV-2和CyHV-3阳性的各有 3份,其阳性率都为 33.3%;分别对 2份CyHV-2和CyHV-3阳性样品混合后进行检测,结果混合样品均为CyHV-2和CyHV-3双阳性,与常规检测方法得到的结果相同.[结论]本研究建立的双重PCR检测方法特异性强、灵敏度高,可用于CyHV-2和CyHV-3的快速检测和鉴别诊断.

外文标题：Dual PCR Detection of Type 2 and 3 Cyprinus Herpesvirus

外文关键词：

Cyprinus carpioCyprinus herpesvirusDouble PCR

作者：

陈永聪、方勤美、柯翎

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作者单位：

福建省农业科学院生物技术研究所,福建福州 350003

关键词：

鲤疱疹病毒双重PCR

基金：

福建省科技计划公益类专项福建省科技计划公益类专项

项目编号：

2020R102700102021R1027008

出版年：

2023

DOI：

10.19303/j.issn.1008-0384.2023.06.003

福建农业学报

福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心

影响因子：0.656

ISSN：1008-0384

年,卷(期)：2023.38(6)

参考文献量4