首页|灌溉水源中沙门氏菌的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

灌溉水源中沙门氏菌的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

扫码查看
原文链接
  • 国家科技期刊平台
  • NETL
  • NSTL
  • 万方数据
[目的]建立基于SYBR Green I嵌合染料法的灌溉水源中沙门氏菌实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)检测方法.[方法]以沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因为靶基因,设计 1对特异性qPCR检测引物,在对qPCR反应体系和反应条件进行优化后,通过特异性实验和灵敏度实验对qPCR方法进行验证,并制作灌溉水源中沙门氏菌qPCR定量标准曲线,最后与国标方法对比检测灌溉水源中沙门氏菌污染来验证该方法的准确性.[结果]经过优化的qPCR检测方法灵敏度检测结果显示最低检测限量为 1×10-1 pg·μL-1,特异性检测结果显示具有良好的特异性,干扰菌株对本qPCR检测方法无影响,所制作的qPCR扩增标准曲线在 2×100～2×105 cfu·mL-1有较好的线性关系,相关系数为 0.9996,能对沙门氏菌进行准确的定量分析.该方法在与国标方法对比检测灌溉水源中沙门氏菌污染时具有同等准确性.[结论]本研究建立的基于SYBR Green I嵌合荧光法的实时荧光定量PCR检测方法,可以满足灌溉水源中沙门氏菌的定量检测要求.
SYBR Green Ⅰ RT-PCR Assay for Quantitative Detection of Salmonella in Irrigation Water

Quantitative RT-PCRIrrigated waterSalmonella

吕新、刘兰英、李玥仁

展开 >

福建省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,福建 福州 350003

福建省农产品质量安全重点实验室,福建 福州 350003

实时荧光定量PCR 灌溉水源 沙门氏菌

福建省科技计划公益类专项福建省农科院科技创新团队建设项目福建省高质量发展超越"5511"协同创新工程项目

2020R1022005CXTD2021011-3XTCXGC2021020

2023

10.19303/j.issn.1008-0384.2023.08.013

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2023.38(8)
  • 10