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圆圈病毒3型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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[目的]建立一种检测圆圈病毒 3型(Gyrovirus 3,GyV3)的TaqMan荧光定量PCR方法,为GyV3提供快速便捷的检测技术手段.[方法]根据NCBI数据库中GyV3 VP2基因保守区序列,设计一对特异性检测引物和一条标记FAM荧光基团的探针,经过条件优化,建立用于检测GyV3的TaqMan实时荧光定量PCR快速检测方法,并进行特异性、敏感性、重复性以及模拟样品的检测试验.[结果]该方法灵敏性高,最低检测限度为 1.585 copies·μL-1;特异性强,对其他常见禽病原不发生非特异性反应;重复性好,批内和批间变异系数均小于 1%;对鸡肝脏组织DNA加入重组质粒制备的模拟样品同时进行TaqMan荧光定量PCR与SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测,均扩增出与预期相符的扩增曲线.[结论]首次建立用于检测GyV3的TaqMan实时荧光定量PCR快速检测方法,具有灵敏性高、特异性强、重复性好等优点,为GyV3的诊断和流行病学调查提供了技术支持.
A TaqMan RT-qPCR Assay for Gyrovirus 3 Detection

Gyrovirus 3RT-qPCRdetection assaytransmissible viral proventriculitis

庄丽云、陈伟晨、戴婷婷、雷天宇、陈海玉、郑新添

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2022KF03S202311312057

2023

10.19303/j.issn.1008-0384.2023.09.003

福建农业学报
福建省农业科学院

福建农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.656
ISSN：1008-0384
年,卷(期)：2023.38(9)
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