首页|一种改良的红豆杉成熟针叶总RNA提取方法

一种改良的红豆杉成熟针叶总RNA提取方法

扫码查看
红豆杉(Taxus chinensis(Pilger)Rehd.)是一种重要的药源植物,根据红豆杉针叶特点,本研究提出改良RNA提取方法,即十六烷基三甲基溴化铵-氯化锂(CTAB-LiCl)联用法,以红豆杉的幼嫩、成熟针叶为材料,采用TRIzol法提取RNA,结果表明,TRIzol法提取嫩针叶中的RNA质量完整,成熟针叶中的RNA质量不完整;针对成熟针叶采用CTAB法、SDS-酚法和改良的CTAB-LiCl法提取RNA,并进行了质量验证比对显示,CTAB法和SDS-酚法提取的RNA质量差,并存在不同程度的多糖、多酚和DNA污染,改良CTAB-LiCl联用法提取红豆杉成熟针叶的RNA质量完整,A260/A280比值在1.9~2.0之间,RNA产率最高,分别为CTAB法和SDS-酚法提取的RNA产率的1.37和1.24倍.进一步反转录后,利用特异性引物进行扩增验证,发现扩增的片段条带清晰,片段大小符合预期.成熟针叶中高质量的RNA更有利于红豆杉分子生物学方面的深入研究.
A Modified Method for Total Ribonucleic Acids Extraction from Taxus Chinensis Needles

李德文、杨超、付金颖、刘英、于莉莉、付玉杰

展开 >

东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室,哈尔滨150040

红豆杉 RNA提取 十六烷基三甲基溴化铵-氯化锂法 成熟针叶

十三五国家重点研发计划中央高校基本科研业务费专项资金项目中央高校基本科研业务费专项资金项目黑龙江省自然科学基金

2017YFD06013062572015CA072572015CA03QC2017009

2018

分析化学
中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所

分析化学

CSTPCDCSCD北大核心SCIEI
影响因子:1.423
ISSN:0253-3820
年,卷(期):2018.46(9)
  • 1
  • 13