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猪丁型冠状病毒S基因的原核表达及多克隆抗体的制备

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纤突(Spike,S)蛋白是猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)诱导机体产生抗体的主要抗原,为制备其重组蛋白和多克隆抗体,本实验对分离株CHN/20GXNN-1/2020 的S基因进行序列分析,选择抗原指数较高的b区S1b,克隆至表达载体pET-32a进行原核表达,重组蛋白S1b主要以包涵体形式表达,大小约为 34.1 kDa.利用Ni-NTA琼脂糖树脂纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.通过间接ELISA测定多克隆抗体的效价高于 1∶128000,Western blot和IFA均证明其可以与病毒S蛋白特异性结合.本研究制备的多克隆抗体特异性良好,为进一步研发PDCoV的检测方法和研究S蛋白的功能奠定了基础.
Prokaryotic Expression of Porcine Deltacoronavirus S Gene and Preparation of Polyclonal Antibody

PDCoVs geneprokaryotic expressionpolyclonal antibody

张政、秦秋英、洪大林、覃先锦、樊柳忻、刘科勉、陈樱、韦祖樟、黄伟坚、欧阳康

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广西大学动物科学技术学院 广西高校动物疫病预防与控制重点实验室,广西 南宁 530005

广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心,广西 南宁 530005

广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室,广西 南宁 530005

PDCoV S基因 原核表达 多克隆抗体

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2023

广西农学报
广西农业广播电视学校

广西农学报

影响因子：0.322
ISSN：1003-4374
年,卷(期)：2023.38(5)
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