摘要
目的 初步探究环状RNA103809(circRNA_103809)调节胃癌干样细胞特性和线粒体功能的方法.方法 设计3组干扰circRNA_103809的shRNA转染胃癌(SGC-7901)细胞株,选择干扰效果最好的shRNA进行后续研究;将SGC-7901细胞分为Control组、shRNA-NC组和sh-circ103809组;采用Western blot法和RT-PCR检测干细胞标志物细胞黏附分子44(CD44)、胚胎干细胞关键蛋白(SOX2)和八聚体结合转录因子4(OCT4)水平;观察肿瘤细胞成球情况;采用流式细胞术检测线粒体膜电位变化;采用 Western blot法检测线粒体损伤标志物兔抗人单克隆抗体(Bax)/B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、裂解半胱天冬酶9/半胱氨酸蛋白酶9(Caspase9)、裂解半胱天冬酶3/半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)表达.结果 sh-circ103809组CD44、SOX2和OCT4蛋白及mRNA水平明显低于Control组和shRNA-NC组(P<0.05).与Control组和shRNA-NC组相比,sh-circ103809 组细胞成球直径减小、成球率降低(P<0.05).sh-circ103809组线粒体膜电位低于 Control 组和 shRNA-NC 组(P<0.05).sh-circ103809 组 Bax/Bcl-2、Caspase9/β-actin、Caspase3/β-actin蛋白表达水平明显高于Control组和shRNA-NC组(P<0.05).结论 干扰circRNA_103809表达可抑制干细胞标志物蛋白表达及胃癌细胞体外成瘤能力,降低线粒体膜电位,进而促进细胞凋亡、抑制肿瘤的发展进程.
维普
万方数据