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鸡血藤ISSR体系优化及引物筛选

Optimization of the ISSR system and primer screening for caulis spatholobi

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以鸡血藤的入药部位藤茎为试验材料,采用改良CTAB法进行DNA提取,利用正交试验和单因素试验对ISSR-PCR反应体系进行优化和构建.结果表明,鸡血藤最佳ISSR-PCR反应体系为DNA模板60 ng,Taq酶2.00 U,Mg2+浓度1.75 mmol/L,dNTP浓度 0.25 mmol/L,引物浓度0.20 μmol/L,最佳退火温度44.6℃.从100条ISSR引物筛选出20条适合鸡血藤的ISSR引物.
The stem of caulis spatholobi was used as the experimental material for DNA extraction using the improved CTAB method.The ISSR-PCR reaction system was optimized and constructed using orthogonal and single factor experiments.The results showed that the optimal ISSR-PCR reaction system for caulis spatholobi was DNA template 60 ng,Taq enzyme 2.00 U,Mg2+ concentration 1.75 mmol/L,dNTP concentration 0.25 mmol/L,primer concentration 0.20 μmol/L,and optimal annealing temperature 44.6℃.20 ISSR primers suitable for caulis spatholobi from were selected 100 ISSR primers.

caulis spatholobiISSRmolecular markersprimer screeningorthogonal designsystem optimization

李金梅、王一婷、潘丽梅、黄晓东、谭勇、汝梅、刘雯

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广西中医药大学药学院/第一附属医院,南宁 530200

鸡血藤 ISSR 分子标记 引物筛选 正交设计 体系优化

广西中医药大学博士启动基金项目广西中医药大学青年创新研究团队项目

2017BS0292018QT001

2024

湖北农业科学
湖北省农业科学院 华中农业大学 长江大学 黄冈师范学院

湖北农业科学

CSTPCD
影响因子:0.442
ISSN:0439-8114
年,卷(期):2024.63(1)
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