湖北农业科学2024,Vol.63Issue(1) :206-211.DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.01.037

鸡血藤ISSR体系优化及引物筛选

Optimization of the ISSR system and primer screening for caulis spatholobi

李金梅 王一婷 潘丽梅 黄晓东 谭勇 汝梅 刘雯
湖北农业科学2024,Vol.63Issue(1) :206-211.DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.01.037

鸡血藤ISSR体系优化及引物筛选

Optimization of the ISSR system and primer screening for caulis spatholobi

李金梅 1王一婷 1潘丽梅 1黄晓东 1谭勇 1汝梅 1刘雯1
扫码查看

作者信息

  • 1. 广西中医药大学药学院/第一附属医院,南宁 530200
  • 折叠

摘要

以鸡血藤的入药部位藤茎为试验材料,采用改良CTAB法进行DNA提取,利用正交试验和单因素试验对ISSR-PCR反应体系进行优化和构建.结果表明,鸡血藤最佳ISSR-PCR反应体系为DNA模板60 ng,Taq酶2.00 U,Mg2+浓度1.75 mmol/L,dNTP浓度 0.25 mmol/L,引物浓度0.20 μmol/L,最佳退火温度44.6℃.从100条ISSR引物筛选出20条适合鸡血藤的ISSR引物.

Abstract

The stem of caulis spatholobi was used as the experimental material for DNA extraction using the improved CTAB method.The ISSR-PCR reaction system was optimized and constructed using orthogonal and single factor experiments.The results showed that the optimal ISSR-PCR reaction system for caulis spatholobi was DNA template 60 ng,Taq enzyme 2.00 U,Mg2+ concentration 1.75 mmol/L,dNTP concentration 0.25 mmol/L,primer concentration 0.20 μmol/L,and optimal annealing temperature 44.6℃.20 ISSR primers suitable for caulis spatholobi from were selected 100 ISSR primers.

关键词

鸡血藤/ISSR/分子标记/引物筛选/正交设计/体系优化

Key words

caulis spatholobi/ISSR/molecular markers/primer screening/orthogonal design/system optimization

引用本文复制引用

基金项目

广西中医药大学博士启动基金项目(2017BS029)

广西中医药大学青年创新研究团队项目(2018QT001)

出版年

2024
湖北农业科学
湖北省农业科学院 华中农业大学 长江大学 黄冈师范学院

湖北农业科学

CSTPCD
影响因子:0.442
ISSN:0439-8114
参考文献量18
段落导航相关论文