miR-1224-5p靶向调控HMOX1基因对心肌细胞缺血再灌注损伤的影响

Effects of miR-1224-5p targetedly regulating HMOX1 gene on myocardial ischemia-reperfusion injury in vitro

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中文摘要：目的探讨微小RNA-1224-5p(miR-1224-5p)靶向调控血红素加氧酶1(HMOX1)基因对大鼠心肌细胞H9C2缺血再灌注(I/R)损伤的影响.方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,模拟心肌I/R损伤.按照处理方法将大鼠心肌H9C2细胞分为对照组(Control组)、I/R组、I/R+anti-miR-con组、I/R+anti-miR-1224-5p组、I/R+anti-miR-1224-5p+si-con组、I/R+anti-miR-1224-5p+si-HMOX1组.qRT-PCR检测miR-1224-5p表达水平,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,Western Blot检测HMOX1蛋白表达水平.StarBase在线网站预测显示,HMOX1的3'-非翻译区(3'UTR)存在miR-1224-5p的结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-1224-5p与HMOX1靶向关系.结果与Control组比较,I/R组miR-1224-5p、凋亡率、MDA、LDH和AST水平升高(P<0.05),H9C2细胞存活率和SOD水平降低(P<0.05).与I/R+anti-miR-con组比较,I/R+anti-miR-1224-5p组miR-1224-5p、凋亡率、MDA、LDH和AST水平降低(P<0.05),H9C2细胞存活率和SOD水平升高(P<0.05).miR-1224-5p在心肌细胞H9C2中抑制HMOX1的表达.与I/R+anti-miR-1224-5p+si-con组比较,I/R+anti-miR-1224-5p+si-HMOX1组H9C2细胞凋亡率、MDA、LDH和AST水平升高(P<0.05),H9C2细胞存活率、HMOX1蛋白和SOD水平降低(P<0.05).结论过表达miR-1224-5p通过靶向负调控HMOX1表达保护心肌细胞缺血再灌注损伤.

作者：

代天、杨萍、刘波、张苏川

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作者单位：

430015 武汉市,江汉大学附属医院(武汉市第六医院)心血管内科

关键词：

心肌细胞缺血再灌注损伤 miR-1224-5p 血红素加氧酶1 保护作用

出版年：

2021

DOI：

10.3969/j.issn.1002-7386.2021.03.001

河北医药