miR-582-5p靶向DNMT1对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响

Effects of miR-582-5p targeting DNMT1 on the proliferation and apoptosis of human keloid fibroblasts

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中文摘要：目的探讨微小RNA-582-5p(miR-582-5p)对DNA甲基转移酶1(DNMT1)的靶向作用及对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响.方法实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)和正常皮肤成纤维细胞(NFB)miR-582-5p、DNMT1 mRNA、DNMT1蛋白表达.starBase网站与双荧光素酶报告实验分析miR-582-5p与DNMT1的靶向关系.瘢痕疙瘩成纤维细胞中转染miR-582-5p或si-DNMT1,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测DNMT1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达.miR-582-5p和pcDNA-DNMT1共转染,观察DNMT1过表达对miR-582-5p过表达诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡的影响.结果与NFB组比较,KFB中miR-582-5p表达量明显减少(P<0.05),DNMT1 mRNA和DNMT1蛋白表达量显著增加(P<0.05).miR-582-5p靶向调控DNMT1的表达.miR-582-5p过表达或抑制DNMT1表达明显抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖、CyclinD1蛋白、Bcl-2蛋白表达(P<0.05),显著促进细胞凋亡、p21蛋白、Bax蛋白表达(P<0.05).DNMT1过表达逆转miR-582-5p过表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、CyclinD1蛋白、Bcl-2蛋白表达的抑制作用,以及对细胞凋亡、p21蛋白、Bax蛋白表达的促进作用.结论 miR-582-5p通过靶向调控DNMT1的表达抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖,并诱导其凋亡.

作者：

高栋梁、高东东、白翠翠、杨波、杨喜明

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作者单位：

716000 陕西省延安市,延安大学附属医院烧伤整形手外科

关键词：

miR-582-5p DNMT1 人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖凋亡

出版年：

2021

DOI：

10.3969/j.issn.1002-7386.2021.09.004

河北医药