目的 研究沉默分泌磷蛋白1(SPP1)联合吉西他滨在胰腺癌细胞增殖、细胞周期、凋亡中的作用及机制.方法 将胰腺癌PaTu 8988t细胞分为空白组(未经任何处理)、si-con组(转染si-con)、si-SPP1组(转染si-SPP1)、吉西他滨组(吉西他滨处理)、si-SPP1+吉西他滨组(转染si-SPP1和吉西他滨处理).实时荧光定量PCR(qPCR)检测SPP1 mRNA表达,细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖,Western blot检测SPP1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(c-Caspase-3)、P糖蛋白(Pgp)和MDR1蛋白表达,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V染色分析细胞凋亡.结果 与空白组比较,si-SPP1组胰腺癌PaTu 8988t细胞中SPP1 mRNA和SPP1蛋白表达量明显减少(P<0.05).与si-con组比较,si-SPP1组和吉西他滨组PaTu 8988t细胞的细胞活力、CyclinD1、Pgp和MDR1蛋白表达量显著降低,c-Caspase-3蛋白表达量、细胞凋亡率、G0/G1期细胞百分比明显增加,S期细胞百分比显著减少(P<0.05),G2/M期细胞百分比无明显变化(P>0.05).与si-SPP1组或吉西他滨组比较,si-SPP1+吉西他滨组PaTu 8988t细胞的细胞活力、CyclinD1、Pgp和MDR1蛋白水平显著降低(P<0.05),c-Caspase-3蛋白水平、细胞凋亡率、G0/G1期细胞百分比明显升高(P<0.05),S期细胞百分比显著减少(P<0.05),G2/M期细胞百分比无明显变化(P>0.05).结论 沉默SPP1联合吉西他滨可以抑制胰腺癌细胞增殖,阻滞细胞周期,并诱导细胞凋亡,机制与调控Pgp和MDR1蛋白表达有关.
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