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miR-452-5p调控YTHDF2肝细胞癌细胞凋亡和铁死亡的机制研究

Mechanism of miR-452-5p regulating the apoptosis and ferroptosis of hepatocellular carcinoma cells through YTHDF2 in vitro

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目的 探究miR-452-5p、YTH结构域家族成员2(YTH domain family,member 2,YTHDF2)调控肝细胞癌细胞凋亡、铁死亡的作用及其机制.方法 运用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测L02、SMMC-7721、HepG2、Huh7、Hep3B细胞中miR-452-5p、YTHDF2的表达;脂质体法将anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、anti-miR-452-5p组(转染anti-miR-452-5p)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-YTHDF2组(转染pcDNA-YTHDF2)、anti-miR-452-5p+si-con组(转染anti-miR-452-5p+si-con)、anti-miR-452-5p+si-YTHDF2组(转染anti-miR-452-5p+si-YTHDF2)转染HepG2细胞;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙锭(PI)双染法检测细胞凋亡率;细胞计数试剂盒(cell counting kit,CCK8)法检测细胞活性;蛋白免疫印迹(western blotting,WB)实验检测细胞中YTHDF2、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白重链(FTH1)的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.结果 与正常肝细胞比较,肝细胞癌细胞(SMMC-7721、HepG2、Huh7、Hep3B)中miR-452-5p显著升高,YTHDF2显著降低(P<0.05);抑制miR-452-5p明显抑制HepG2细胞活性,促进凋亡,促进ROS、SLC7A11、GPX4和FTH1表达(P<0.05).过表达YTHDF2具有与抑制miR-452-5p相类似的HepG2细胞调控作用.miR-452-5p显著抑制野生型YTHDF2细胞的荧光活性,并负向调控YTHDF2表达.敲减YTHDF2部分逆转抑制miR-452-5p对HepG2细胞凋亡、铁死亡的调控作用.结论 miR-452-5p在肝细胞癌细胞中高表达,抑制miR-452-5p促进癌细胞凋亡、铁死亡,其机制与靶向YTHDF2有关.

王雪梅

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734000 甘肃省张掖市,河西学院附属张掖人民医院

miR-452-5p 肝细胞癌 YTHDF2 凋亡 铁死亡

甘肃省卫生厅医药科研计划

1292GS2016B14

2022

10.3969/j.issn.1002-7386.2022.23.005

河北医药
河北省医学情报研究所

河北医药

CSTPCD
影响因子：1.075
ISSN：1002-7386
年,卷(期)：2022.44(23)
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