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轮状病毒SA11株NSP2蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

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构建轮状病毒SA11株NSP2蛋白原核表达质粒,纯化重组蛋白并制备多克隆抗体.根据GenBank中登录的轮状病毒SA11株NSP2基因组序列(LC178571.1)设计特异性引物,用PCR方法扩增并将其连接至pET-28a(+)载体,构建重组表达质粒pET-28a-NSP2,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定.将纯化后的重组蛋白与ISA206佐剂乳化免疫豚鼠,制备NSP2多克隆抗体,并通过ELISA测定抗体效价.重组蛋白以包涵体的形式表达,相对分子质量为35 kDa,ELISA法测定多克隆抗体效价>1:5000.成功表达了轮状病毒SA11株NSP2蛋白并获得其多克隆抗体,为NSP2蛋白结构与功能的研究奠定基础.
Prokaryotic Expression of NSP2 Protein of Rotavirus and Preparation of Polyclonal Antibody

陈肖宏、闻晓波、冉旭华

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黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319

轮状病毒 NSP2蛋白 原核表达 多克隆抗体

黑龙江省自然科学基金联合引导项目黑龙江八一农垦大学研究生创新项目

LH2019C052YJSCX2018-Y25

2021

10.3969/j.issn.1002-2090.2021.01.003

黑龙江八一农垦大学学报
黑龙江八一农垦大学

黑龙江八一农垦大学学报

影响因子：0.888
ISSN：1002-2090
年,卷(期)：2021.33(1)
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