共表达ETEC 987P、K88重组乳杆菌构建及其免疫原性分析

Construction and Immunogenicity Analysis of Lactic Acid Bacteria Vector Vaccine with Recombinant Escherichia coli 987P and K88 Proteins Demonstrated on the Surface

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中文摘要：构建表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)987P和K88蛋白的重组干酪乳杆菌,并对重组干酪乳杆菌免疫原性进行分析.通过PCR构建重组质粒pLA-987P-K88并电转化至干酪乳杆菌6105后进行表达,通过Western blot、间接免疫荧光和流式细胞术检测目的蛋白的表达情况.将重组干酪乳杆菌灌胃免疫BALB/c小鼠,三次免疫后用ELISA检测小鼠血清中IgG抗体和肠冲洗液中sIgA抗体水平,采用CCK-8检测淋巴细胞的增殖情况,用C83916(987P)株和C83902(K88)株进行攻毒保护性试验检测其保护率.结果显示,重组干酪乳杆菌成功表达987P-K88融合蛋白,小鼠免疫重组菌后血清中IgG抗体水平和肠冲洗液sIgA水平显著升高,细胞免疫水平明显增长,攻毒保护性试验结果显示,重组菌能同时对C83916(987P)株和C83902(K88)株具有良好的保护作用.

作者：

杨雨晴、李树东、孙晓莹、陈小燕、白永飞、李颖、蔡昌福、余丽芸、侯喜林

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作者单位：

黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319

黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院

关键词：

产肠毒素大肠杆菌 987P K88 重组干酪乳杆菌免疫原性

基金：

省高等学校产业化前期培育项目研究生创新项目

项目编号：

1253CGZH14YJSCX2019-Y29

出版年：

2022

DOI：

10.3969/j.issn.1002-2090.2022.02.007

黑龙江八一农垦大学学报

黑龙江八一农垦大学

黑龙江八一农垦大学学报

影响因子：0.888

ISSN：1002-2090

年,卷(期)：2022.34(2)

参考文献量10