冷暴露诱导TLR2和TLR4小鼠腹腔原代中性粒细胞形成NETs的初步研究

Preliminary Study on the Formation of NETs from Primary PMNs in the Abdominal Cavity of TLR2 and TLR4 Mice Induced by Cold Exposure

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中文摘要：中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞活化后释放到胞外的一种纤维网状结构,此过程被称为嗜中性粒细胞病(NETosis),近年来被广泛关注.研究目的旨在探讨TLR2和TLR4基因敲除小鼠腹腔原代中性粒细胞(Polymorp honuclears,PMNs)在冷暴露条件下形成NETs的能力.将8只基因敲除小鼠随机平均分为常温对照组(n=4)和4℃冷暴露组(n=4),并将此组小鼠置于4℃人工气候室中饲养3 h·d-1,连续一周后处死,提取腹腔原代PMNs.首先采用普通PCR法鉴定小鼠TLR2、TLR4基因成功敲除后,再通过扫描电镜的方法对PMNs形态结构的变化进行定性分析.PicoGreen核酸定量分析试剂盒检测细胞上清液中胞外DNA(Cell free DNA,cfDNA)的浓度,蛋白质免疫印迹方法检测瓜氨酸化的组蛋白(Citrullinated Histone 3,CitH3)和髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)的蛋白表达水平进行定量分析.结果显示:冷暴露组的PMNs表面有明显的皱缩变形,且有类似于伪足结构的NETs生成;NETs的组件蛋白CitH3、MPO的表达水平和cfDNA的浓度均显著升高.冷暴露能够诱导TLR2和TLR4基因敲除小鼠腹腔原代中性粒细胞形成NETs.

作者：

鞠憬、徐彬、刘洋、曹禹、胡亚捷、周万慧、杨玉英、李士泽

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作者单位：

黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319

关键词：

中性粒细胞中性粒细胞诱捕网冷应激 TLR2 TLR4

基金：

黑龙江省自然科学基金重点项目国家自然科学基金国家自然科学基金国家重点研发计划

项目编号：

ZD2019C00431972637317726952016YFD0501210

出版年：

2022

DOI：

10.3969/j.issn.1002-2090.2022.04.008

黑龙江八一农垦大学学报

黑龙江八一农垦大学

黑龙江八一农垦大学学报

影响因子：0.888

ISSN：1002-2090

年,卷(期)：2022.34(4)

被引量1
参考文献量5