猫传染性腹膜炎病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体制备

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中文摘要：为制备猫传染性腹膜炎病毒N蛋白特异性多克隆抗体,研究根据HLJ/HRB/2016/11 毒株N基因序列设计引物,通过PCR进行基因扩增,并将目的基因在BamH Ⅰ、Hind Ⅲ酶切位点克隆至pET32a(+)原核表达载体上,将其转化到BL21(DE3)感受态细胞,经终浓度为 1 mmol·L-1 的IPTG在 16℃诱导 16 h后,SDS-PAGE检测表达产物,结果显示,在约 69 kda处出现目的条带,且该蛋白主要以可溶形式表达.将重组N蛋白经Ni柱纯化后,按每只BALB/c小鼠免疫 50 μg,三免后 7 d采血分离血清,经间接ELSA检测结果显示,获得的N蛋白可被特异性识别且效价可达到 1:12800.研究制备的猫传染性腹膜炎病毒N蛋白及其多克隆抗体为后续猫传染性腹膜炎的疫苗提供基础.

外文标题：Prokaryotic Expression of Feline Infectious Peritonitis Virus N Protein and Preparation of Polyclonal Antibody

作者：

赵飞宇、杨丹、赵鹏宇、李梓健、李璐、孙东波

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作者单位：

黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319

关键词：

猫传染性腹膜炎病毒衣壳蛋白原核表达多克隆抗体

基金：

黑龙江八一农垦大学三横三纵科研团队支持计划

项目编号：

TDJH201804

出版年：

2023

DOI：

10.3969/j.issn.1002-2090.2023.01.008

黑龙江八一农垦大学学报

黑龙江八一农垦大学

黑龙江八一农垦大学学报

影响因子：0.888

ISSN：1002-2090

年,卷(期)：2023.35(1)

参考文献量5